Определение групповой принадлежности крови

Группы системы АВО. Выделяют 4 группы крови по полной формуле: 0αβ(I), Аβ(II), Bα(III), AB0(IV). Так как определяются только агглютиногены (А, В), то агглютинины (а, Р) в обозначении формул не приводятся. Распространенность групп крови: 0(1) — 33,5 %; А(II)-37,8%; B(III)-20,6%; AB(IV)—8,1%. Исследование осуществляется прямой реакцией — методом агглютинации эритроцитов крови стандартными сыворотками 0αβ(I); Аβ(II); Bα(III)—на белых пластинках (можно использовать плоские тарелки, обычно стекло с подложенной бумагой и пр.), при температуре окружающей среды +15 … +20 °С (при меньшей температуре пластины осторожно подогреть основанием в теплой воде, при большей — охладить). Обращать внимание: на срок годности сыворотки, инструкцию при них, необходимость соблюдения методики исследования, контроль за ходом агглютинации, на достаточность освещения. Используются сыворотки двух разных серий. Пробы крови должны быть меньше порции сывороток. Необходимые принадлежности (расположить в последовательности): флаконы со стандартными сыворотками (в каждом — своя пипетка); флакон с изотоническим раствором натрия хлорида; стакан с чистыми стеклянными палочками; стакан с водой; перед ними поставить промытую, высушенную пластину.

Техника. Написать на пластине фамилию, инициалы больного, обозначения стандартных сывороток.

Крупные капли каждой серии сывороток нанести на пластину в соответствии с обозначением, по горизонтали (6 капель в два ряда); пипетки сразу же опустить во флаконы.

Маленькие капли исследуемой крови расположить в непосредственной близости, под каждой каплей сывороток. Сухой стеклянной палочкой перемешать эти пары капель (для каждой пары должна быть отдельная палочка); смеси должны стать равномерно красными. Немного покачать пластину, оставить в неподвижности на 1—2 мин, затем опять покачивать в течение 5 мин. Следить за реакцией: начало агглютинации — в первые 10—30 с; возможна, однако, поздняя агглютинация — в течение 5 мин. В капли, где агглютинация уже произошла, через 3 мин добавить изотонический раствор натрия хлорида (по 1 капле).

При положительной реакции в смеси появляются агглютинаты — мелкие красные скопления склеившихся эритроцитов. Нарастающее укрупнение агглютинатов приводит к обесцвечиванию сыворотки. При отрицательной реакции агглютинаты отсутствуют. При развитии агглютинации во всех 3 группах — группа крови АВ (IV) следует провести контроль со стандартной сыво­роткой АВ (IV): нанести на пластину каплю сыворотки; добавить в нее небольшую каплю крови, перемешать, наблюдать 5 мин. Отсутствие агглютинации свидетельствует о специфичности реакции — группа крови АВ (IV) подтверждается.

Полученные данные вписать в соответствующий документ, поставить дату, расписаться.

Основные причины ошибок: неверное расположение флаконов с сыворотками; несоответствие капель сывороток, нанесенных на пластину, с обозначениями на пластине; использование одной пипетки (палочки) для нескольких сывороток; загрязненность реактивов или принадлежностей; просроченность сывороток; неверная трактовка результатов.